细胞培养基本分这三类，贴壁细胞， 悬浮细胞和半悬浮细胞，贴壁细胞在科研实验中占比最大，因而在遇到悬浮细胞的时候通常会觉得这怎么办？
悬浮细胞顾名思义就是细胞悬浮在培养基中生长，所以在培养的时候一定要在瓶子上做好备注，免得像培养贴壁细胞一样，一下就给当废液全弃掉了
悬浮细胞的培养和换液技巧主要包括以下几个步骤：
1. 准备工作：在进行悬浮细胞培养之前，确保所有实验器材和材料都已无菌处理。准备培养基、细胞悬液、离心管、移液管、培养瓶等。
2. 细胞接种：将细胞悬液均匀接种到含有新鲜培养基的培养瓶中。注意接种时动作要轻柔，接种密度要保持在35%以上， 避免产生气泡。
3. 培养条件：将接种好的细胞放置在适宜的温度和CO2浓度的培养箱中培养。悬浮细胞培养时可以提供培养基在瓶中的比例，悬浮细胞铺板后，将瓶子在水平面打十字震动，以保持细胞悬浮状态并且密度均一。
4. 换液和操作：当培养基颜色变黄或细胞密度达到一定水平时，需要进行换液。首先，将细胞悬液转移到离心管中，以低速离心（通常为1000rpm左右）几分钟，使细胞沉淀。去除旧培养基：小心地吸出上层的旧培养基，注意不要扰动细胞沉淀。添加新鲜培养基：向离心管中加入适量的新鲜培养基，轻轻悬浮细胞沉淀。
5. 重新接种：将悬浮好的细胞悬液重新接种到新的培养瓶中，继续培养。
若悬浮细胞生长比较慢，隔2-3天观察一次，若培养基无颜色变化，以T25为例，每2-3天可以额外添加250ul-500ul的血清，以满足细胞营养需求 ，若瓶内液体太多，可以将培养瓶竖起来放置在超净台内，待细胞完全沉淀下来，用吸管小心的吸取培养瓶内上层液面培养基，添加500ul新的培养基或者血清。
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悬浮细胞冻存：
悬浮细胞无需胰酶消化，可以直接离心后冻存， 若细胞成团较多较大，可以去除旧的培养基，PBS清洗一次，加胰酶消化1-2分钟后，轻轻震动培养瓶，待细胞分散后加入完全培养基终止，离心，加冻存液冻存。
在整个过程中，要确保操作的无菌性，避免污染细胞。此外，根据细胞类型和实验要求，可能需要调整培养基的成分、细胞密度和换液频率。