产品说明
胆固醇是一种类脂，也称胆甾醇，主要存在于细胞膜中，并经血液来运输。胆固醇用于生成细胞膜与激素，在细胞信号传导过程中也起着重要的作用。过高的胆固醇含量(高胆醇血症)与心血管疾病(如动脉粥样硬化等)有关；而过低的胆固醇含量(低胆醇血症)则可能与抑郁症，癌症与脑出血有关。
简单、直接、自动化的胆固醇含量检测手段是最为理想的。本公司所生产的胆固醇测试盒仅使用单一工作试剂，将胆甾醇酯水解、氧化及显色反应结合为一个步骤。反应产物的吸光强度(570nm) 或荧光强度(lem/ex = 585/530nm）与样本中的总胆固醇浓度成正比。
产品特点
灵敏、准确：比色法1到100 mg/dL胆固醇；荧光法0.2到10 mg/dL胆固醇。
操作简便：室温下进行检测，无需37 °C加热器。
高通量： 通过96孔板上的高通量检测手段，每天可以测试上千份样本。
适用范围
可直接检测血清、血浆与其它生物样本中的胆固醇含量，也可用于检测药物对胆固醇代谢的影响。
试剂盒组成(96孔板供100份测试)
缓冲液：20 mL 酶试剂：120 μL
显色剂: 120 μL 标准品：1 mL 300 mg/dL 胆固醇溶液
储藏条件：试剂在-20°C条件下保存。保质期6个月。
注意事项：本产品仅供研究用。使用过程中应严格遵循实验安全措施。
比色法检测步骤
在检测前应将所有试剂置于室温。血清与血浆样品应当透明，无浑浊和沉淀；若有沉淀则需过滤或离心除去。样品在-20 至-80 °C 可存放一年以上。
1. 标准曲线：先将8 μL 300 mg/dL的标准品与232 μL缓冲液混合，配成10倍浓度为100 mg/dL的标准品。按下表比例用缓冲液进一步稀释标准品，将稀释的标准品各取50μL加入透明96孔板。
编号 | 标准品 + 缓冲液 | 容量 | 10倍浓度mg/dL |
1 | 100μL + 0μL | 100μL | 100 |
2 | 60μL + 40μL | 100μL | 60 |
3 | 30μL + 70μL | 100μL | 30 |
4 | 0μL + 100μL | 100μL | 0 |
样品：先将样品稀释10倍（例如将10 μL样品与90 μL缓冲液混合）。取50μL稀释后的样品溶液加入96孔板。
2. 按照每孔需缓冲液55 μL、酶试剂1 μL、染色剂1 μL的比例，为所有反应孔配制足量工作试剂，并在每个标准品与样品孔中加入50 μL工作试剂，轻拍使其混合。
3. 室温下培养30分钟，在570nm波长下读取OD值。
备注：若样品的OD值比100 mg/dL标准品的OD值高，需用缓冲液将样品再稀释并重复检测，所得结果需乘稀释系数。
荧光法检测步骤
1. 使用荧光测定法时，线性测量范围为0.2 到10 mg/dL 胆固醇。将比色检测过程中制备的标准品再用缓冲液稀释10倍成为0, 3, 6, 10 mg/dL胆固醇。
2. 取黑色96孔板，将50 μL标准品与50 μL样品加入不同孔。
3. 每孔加入50 μL工作试剂(见比色法)，轻拍孔板使其混合。
4. 在室温下反应30分钟，在lem = 585nm，lex = 530nm的条件下读取荧光值。
5. 如在384孔板中检测，则使用5 μL标准品/样品与45 μL工作试剂。
浓度计算
用标准品的值R标准品 减去空白对照值R空白(缓冲液，4号)，对标准品浓度作图得出斜率。样品的胆固醇浓度计算如下,
备注：由于标准品与样品溶液都已稀释10倍，故此处无需再乘稀释因子。
实验必需品(未提供)：多管移液管、96孔板，微孔板分析仪。
Cholesterol Standard Curves |
